昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-...
植物、動物、人類都存在RNA干擾現象,這對于基因表達的管理、參與對病菌傳染的防護、控制活躍基因具有重要意義。RNA干擾是一個生物過程,在這個過程中雙鏈RNA以一種非常明確的方式壓制了基因表達。自1998年發現以來,RNA干擾已經作為一種強大的“基因沉默”技術而出現。RNA干擾作為研究基因運行的一種研究方法已被普遍應用于基礎科學,它可能在將來產生更多更新的醫治方法。科學家認為,RNA干擾技術不僅是研究基因功能的一種強大工具,不久的未來,這種技術也許能用來直接從源頭上讓致病基因“沉默”,以醫治病癥甚至一些病,在農業上也將大有可為。普通的提取實驗用國產的試劑盒就足以,價格不高,基本上各地均有現貨。合...
Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,經過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質,進行密度梯度超速離心,RNA沉淀于管底,而...
總RNA提取試劑是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗。是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于R...
RNA提取注意事項:所有實驗所用的泵頭、離心管等消耗品均要使用RNase-free的;整個過程要在無RNase污染的條件下進行,通常可以在無菌操作臺中進行實驗,并用75%的酒精進行擦拭殺菌,如有必要也可在實驗前噴灑一些商用的RNase壓制劑;所有相關溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用無水乙醇與DEPC水配制);溶液的配制使用移液器進行操作,切勿使用量筒等中間器皿;研缽、研棒、鑷子、剪刀等用錫箔紙包好后,200℃干熱滅菌4h;實驗過程中一定要戴手套和口罩;異丙醇、氯仿、乙醇等試劑要使用未開封的,或者開封之后直接分裝至小容量離心管的,以避免多次使用的交叉污染...
RNA提取試劑的選擇:選擇合適的提取試劑是較重要的一步。好的提取試劑在確保成功的同時,操作方便且經濟實用。對于動物組織、簡單的植物材料、各種微生物、培養細胞的totalRNA提取,Takara公司的RNAisoPlus具有諸多的成功案例。隨著2013年7月柱型提取試劑TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市,進一步豐富了TakaraRNA提取的產品線。該產品采用了獨特的細胞裂解系統,無需苯酚氯仿抽提等步驟,簡單快捷。組織或細胞裂解后,提取操作光需20分鐘便可完成~血漿/血清RNA提取試劑盒:該試劑盒中的裂解液P1及柱結合液P2具有高效裂...
細胞質和細胞核RNA提取試劑盒特點:1.有效分離和提取細胞質RNA,與細胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA,品質高,產量多。4.試劑盒不含苯酚,可提取所有RNA(含RNA)。5.純化的RNA可用于任何應用,包括RT-PCR,qRT-PCR,RNA-Seq,陣列等。6.細胞質RNA不含DNA,可直接用于RT-PCR/qRT-PCR。7.試劑盒可用于哺乳動物細胞或者組織樣品的提取。在某些情況下,研究者們更希望能夠提取特定分餾的RNA,而不是總RNA。例如,在一些表達譜研究中,較好能夠提取成熟的細胞質(Cytoplasmic)RNA。或者,在研究分析未剪接的RNA前體時,提取...
總RNA提取試劑是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保護、Poly(A)mRNA純化、體外翻譯等實驗。是一種快速從組織細胞中提取總RNA的單相試劑。在樣品裂解過程中TRIzol能夠壓制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后離心,RNA相將與DNA和蛋白質分離,隨后用異丙醇沉淀RNA。如果需要還可以繼續提取DNA和蛋白質。純化的總RNA可用于R...
通用多糖多酚植物RNA提取試劑盒:1、多糖多酚植物RNA提取試劑盒整合了在提取過程中去除干擾物的技術,已成功用于葡萄,中草藥等多糖含量高的樣品,成功用于棉花等多酚含量高的樣品。另外華越洋還開發了糖類清理劑,PCR壓制物清理劑,核酸提取優化劑,樣品核酸穩定劑,RNA組織樣品保存液等核酸提取輔助產品。2、適用材料普遍:尤其適合解決多醣多酚,色素等次級代謝物豐富的植物樣本難題。昆蟲RNA柱式提取試劑盒特點:操作簡單快速,處理一個樣品只需要約十分鐘。RNA純度高,平均OD260/280一般都在2.0左右,能夠有效去除大多數昆蟲中的多糖污染。適用于各種昆蟲組織,每100mg組織能提取到20~30μg總R...
ScRNA存在于細胞質中,與蛋白質結合成復合體后發揮生物學功能。ScRNA-seq技術應用普遍,于2017年就有科學家利用scRNA繪制出首張小腸細胞圖譜,這不僅增強了我們對腸道細胞產生物體和其他信號的理解,還為腸道如何對不同入侵病原菌做出應答提供了新的線索。科學家還通過scRNA-seq技術揭示了之前位置的細胞亞型,并詳細說明了病菌和病原體入侵傳染時小腸上皮的變化。ScRNA-seq技術為更詳細地研究細胞和組織及疾病提供了新的途徑。siRNA即小干擾RNA,約20-25個核苷酸,由兩條互補的核酸鏈組成,在RNA干擾過程中通過互補的核苷酸序列來干擾特定基因的表達。siRNA與載體結合已應用于基...
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結構乃至三級結構來行使生物學功能。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補配對原則,轉錄而形成的一條單鏈,主要功能是實現遺傳信息在蛋白質上的表達,是遺傳信息向表型轉化過程中的橋梁。在此過程中,轉運RNA是攜帶與三聯體密碼子對應的氨基酸殘基與正在進行翻譯的mRNA結合,而后核糖體RNA將各個氨基酸殘基通過肽鍵連接成肽鏈進而構成蛋白質分子。有些生物,例如一些病菌,也直接使用RNA作為遺傳信息的載體,而不是DNA。拭子RNA提取試劑的選擇?拭子樣本的量與提取的核酸量成正比,提高核酸得率,可通過增加樣本量來實現。南京...
RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化,減少實驗組間的誤差~RNA在260nm波長處有較大的吸收峰。合肥正規RNA提取試劑平均價格血漿/血清中miRNA提...
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-...
RNA指的是核糖核酸。真核生物體的遺傳物質存在于細胞核內,多數的真核生物使用DNA也就是脫氧核糖核酸來作為遺傳的中心物質,但是少量的病菌遺傳物質可以是RNA。正因為病菌的遺傳物質是RNA,所以可以通過檢測病菌的RNA是否存在,或者其濃度和含量來判斷是否存在相應的病菌傳染,傳染的程度及病菌是否仍在大量復制。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種,即A腺嘌呤、G鳥嘌呤、C胞嘧啶、U尿嘧啶,其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。RNA是核糖核酸的縮寫。存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。專門的高鹽緩沖系統允許...
RNA提取試劑的選擇:首先,要確定材料的可用性。盡管現有的RNA提取試劑都用壓制RNase的成分,但提取的材料仍需謹慎處理。提取的材料的新鮮度是獲取完整RNA的關鍵,但是由于種種原因無法立即從新鮮材料中提取RNA時,使用Takara公司的樣品保護劑SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低溫冰箱的不便,同時也可以有效解決組織、細胞樣品的短時間保存及運輸問題。此外,如果將不同時期收集的樣品都預先存放于本試劑中,可以做到立即終止并固定RNA表達的時序變化,減少實驗組間的誤差。RNA的堿基配對規則基本和DNA相同,不過除了A-U、G-C配對外,G-U也可以配對。南京武漢...
核糖核酸(縮寫為RNA,即RibonucleicAcid),存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和堿基構成。RNA的堿基主要有4種,即A(腺嘌呤)、G(鳥嘌呤)、C(胞嘧啶)、U(尿嘧啶),其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。核糖核酸在體內的作用主要是引導蛋白質的合成。人體一個細胞含RNA約10pg(含DNA約7pg)。與DNA相比,RNA種類繁多,分子量較小,含量變化大。RNA可根據結構和功能的不同分為信使RNA和非編碼RNA。非編碼RNA分為非編碼大RNA和非編碼小RNA。非編碼大RNA包括核...
科學家曾經在實驗室里就成功地讓RNA實現了自我復制的功能。不僅如此,還有科學家構建了一種DNA-RNA雜交基因組的大腸桿菌。這個實驗證明,即使有DNA-RNA的雜交鏈的中間態,生物也不至于會死亡。所以,RNA較早可能給就是生物的遺傳物質,只是后來逐步被替代了。當然,還有一些次要的原因,比如,我們都知道DNA是在細胞核當中的,完成生命活動這些步驟其實都在細胞核外進行,因此這樣其實更加安全。而如果是RNA,那就沒有必要存在細胞核了,但是當細胞損失時,就很容易出現問題。因此,DNA后來逐漸取代了RNA作為生物的遺傳物質。但這并不是說RNA不能夠作為遺傳物質,相反它是可以作為遺傳物質而存在的。在提取時...
RNA是核糖核酸,是存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA是由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成的長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子則由磷酸,核糖和堿基構成。在細胞中,根據結構功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據DNA序列轉錄而成的蛋白質合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉運者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質合成的機械。細胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,可調節基因表達。而其他如I、II型內含子、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應過程的活性,即具有酶的活性,這類RNA被稱為核酶。mRNA是依...
RNA的提取:眾所周知,Trizol是一種RNA提取試劑,內含異硫氰酸胍和酚等物質,能迅速破碎細胞和溶解細胞中的其他成分,壓制細胞釋放出核酸酶,維持細胞中RNA的穩定性,我們可以在反應物中加入Trizol后搖勻,在加入氯仿離心,這樣的話我們的RNA就進入了水相中,再用異丙醇沉淀水相中的RNA,即可達到提取總RNA的目的了。首先我們需要稱取一定量的預處理好的廢酵母配10%左右的酵母溶液,在一定溫度下,加入一定濃度的氯化鈉,之后加入NaOH溶液調節反應的pH,攪拌抽提一定時間后,離心分離上清液,調節pH至等電點,經酒精沉淀獲得核糖核酸,用水定容至100mL取1m適當稀釋,調pH7.0,這樣的話RN...
血漿/血清中miRNA提取試劑盒:是專門針對血清、血漿樣本中miRNA提取而開發的,利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質量的miRNA。該試劑盒中的裂解液miRBP1及柱結合液miRBP2具有高效裂解及提取效果。試劑盒中的吸附柱采用特殊的硅基質膜材料,對RNA尤其是smallRNA(107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液會分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機相,RNA分布在上清層中。收集上清層后,經異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種...
RNA是核糖核酸,是存在于生物細胞以及部分病菌、類病菌中的遺傳信息載體。RNA是由核糖核苷酸經磷酸二酯鍵縮合而成的長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子則由磷酸,核糖和堿基構成。在細胞中,根據結構功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。mRNA是依據DNA序列轉錄而成的蛋白質合成模板;tRNA是mRNA上遺傳密碼的識別者和氨基酸的轉運者;rRNA是組成核糖體的部分,而核糖體是蛋白質合成的機械。細胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA,可調節基因表達。而其他如I、II型內含子、HDV、核糖體RNA等等都有催化生化反應過程的活性,即具有酶的活性,這類RNA被稱為核酶。再采集樣本之...
游離RNA(或稱循環RNA,cell-freeRNA,簡稱cfRNA),即存在于細胞外的轉錄產物,包括mRNA和RNA,在人的多種體液中被普遍研究并成為疾病無創性診斷和研究的新分子標志物。文獻總結了以下兩個方面,一方面游離RNA主要來源于tumour細胞,另一方面tumour細胞來源有凋亡、壞死、主動釋放三種機制,目前認為以凋亡為主。游離RNA的生物學特征:游離RNA的結構RNA相對DNA而言,更易被普遍存在的核糖核酸酶所降解,而且病癥患者血清中含有更高濃度的核糖核酸酶,病癥患者血清中以RNA-蛋白脂復合物化學組成來保護RNA,半衰期大約為2天。本試劑盒采用獨特的配方和添加劑,能高效的分離血清...
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將50~300mg昆蟲組織放入10~15mL塑料離心管中,加入1mL溶液A,然后用勻漿器勻漿5~20秒。勻漿時會產生泡沫,但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織,硯磨完后加入1mL溶液A。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產生沉淀,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。將勻漿物或硯磨物轉移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉移非液體的細胞碎片)。在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯仿,在振蕩器上振蕩30秒混勻,此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。室溫12000rmp離心3~...
RNA提取試劑TRIpure是基于世界上使用較普遍的異硫氰酸胍/酚法研制而成的總RNA抽提試劑。在破碎和溶解細胞時能保持RNA的完整性。無論是人、動物、植物還是細菌組織,該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。TRIpure試劑操作上的簡單性允許同時處理多個樣品,所有的操作可以在一小時內完成。TRIpure抽提的總RNA能夠避免DNA和蛋白的污染,故而能夠作RNA印跡分析、斑點雜交、poly(A)+選擇、體外翻譯、RNA酶保護分析和分子克隆等。和進口品牌實驗對照顯示,公司的產品質量已經達到甚至超過了進口產品的質量。...
拭子RNA提取試劑的選擇?1、產品價格。價格也是選購產品的重要考量因素。對于絕大多數實驗如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫構建等,國產試劑盒都能滿足質量要求。與國外有名品牌相比,國產試劑盒的價格較為便宜,價格還不到國外品牌價格的30%,性價比較高。因而,對于以上實驗建議選用國產試劑盒。一些經費不是很多的課題研究或樣本量較大的臨床檢測項目,特別適合選用國產試劑盒。2、與國外有名品牌相比,國產試劑盒在拭子RNA提取純度上略有不足,但不影響大多數實驗,特別是下游需要PCR擴增的實驗和分子雜交類實驗。在提取得率上,國內試劑盒與國外品牌差別不大,而在價格方面...
昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將50~300mg昆蟲組織放入10~15mL塑料離心管中,加入1mL溶液A,然后用勻漿器勻漿5~20秒。勻漿時會產生泡沫,但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎昆蟲組織,硯磨完后加入1mL溶液A。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產生沉淀,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。將勻漿物或硯磨物轉移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉移非液體的細胞碎片)。在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯仿,在振蕩器上振蕩30秒混勻,此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。室溫12000rmp離心3~...
Trizol是一種總RNA抽提試劑,內含異硫氰酸胍等物質,能迅速裂解細胞,壓制細胞釋放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法進行提取組織或細胞中的RNA。原理:在勻質化或溶解樣品中,Trizol試劑可保持RNA的完整性,同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心后,裂解液分層成水相和有機相。RNA存在于水相中。水相轉移后,RNA通過異丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可從中間相沉淀得到DNA,加入異丙醇沉淀可從有機相得到蛋白質。異硫氰酸胍氯化銫超速離心法:原理:使用蛋白質變性劑異硫氰酸胍有效壓制RNA酶的活性,經過起始密度為1.78g/ml的氯化銫介質,進行密度梯度超速離心,RNA沉淀于管底,而...
植物RNA提取試劑產品特點:1.針對植物材料獨特配置,操作更簡單、流程更優化。2.配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染。3.配有CS過濾柱,可有效去除其它雜質。4.RNA純度更高,無雜質殘留,特別適合于對純度要求很高的下游實驗。5.操作安全可靠,無需酚抽提,無需氯化銫梯度離心,無需氯化鋰或乙醇沉淀。用途植物RNA提取試劑可從植物Chemicalbook組織,特別是富含多酚或淀粉的植物組織中(如馬鈴薯塊莖、白松松針或嫩苗和西紅柿葉等),提取高純度的總RNA。操作步驟先將RNaseFree離心管置于干冰中再放入研磨好的冷凍的組織樣品。準備新鮮植物組織,在液氮中研磨成粉狀,如果是干種子,可在...
RNA提取濃度不高或質量不佳原因及解決辦法:1、RNA降解:可能是提取樣本本身降解,或者是在提取過程中導致的降級;應當盡可能使用新鮮樣本進行RNA提取,采集的樣本應當及時置于液氮或者-80℃冰箱凍存,并減少反復凍融。在RNA提取過程中應當使用RNase/DNasefree的吸頭、離心管及其他材料,提取過程盡可能的快,提取后的RNA應置于冰盒上并及時放于-80凍存。如提取后的RNA需要進行凝膠電泳檢測,則應提取好后立刻進行電泳,電泳緩沖液應更換新配制的。2、鹽及有機溶劑殘留:提取試劑中含有酚及胍鹽,洗滌液中含有乙醇,在提取過程中裂解液吸棄不徹底,洗液沒有充分晾干導致的,殘留的鹽及有機溶劑對后續的...
總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實驗操作快速方便,顏色鮮明,便于分層。本試劑適用范圍普遍,可以從動物組織、植物材料、各種微生物及培養細胞等樣品中提取總RNA。該方法對少量的組織(50-100mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在總RNA提取試劑中被充分裂解的同時能夠較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液會分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機相,RNA分布在上清層中。收集上清層后,經異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種分子生物學常規實驗,如RT-PCR、Re...